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TUhjnbcbe - 2024/9/13 16:29:00

新冠无症状感染者是指无相关临床症状,如发热、咳嗽、咽痛等可自我感知或可临床识别的症状与体征,但呼吸道等标本新冠病毒病原学检测阳性者。无症状感染者可分为两种情形:一是感染者核酸检测阳性,经过14天潜伏期的观察,均无任何可自我感知或可临床识别的症状与体征,始终为无症状感染状态;二是感染者核酸检测阳性,采样时无任何可自我感知或可临床识别的症状与体征,但随后出现某种临床表现,即处于潜伏期的“无症状感染”状态。看到这里养殖户朋友们是否会联想到非瘟越来越多的无症状猪感染病例呢?

非洲猪瘟在我国肆虐已经一年多,给养殖业造成了巨大的损失,在与之抗衡的战役中,我们发现,非洲猪瘟感染的猪并不是%都会死亡,有些甚至在猪场发病以后能安然无恙。这就是我们常说的无症状感染猪,就像新冠病毒一样,病情发展到后期,慢慢就会出现无症状的带毒者,他们检测阳性,但是外在无任何相关联的症状表现,甚至看起来非常健康。这类型的猪是否会持续排毒,猪场是否可以留下?之后会对复养造成多大的损害?这些都是值得我们深究的。

欧洲机构在研究ASF病毒在幸存猪上的传播时,选择低毒力的ASF病毒NH/P68株(年葡萄牙毒株)进行猪体内传代研究,发现了感染后无症状及未感染的猪,通过对这些无症状感染猪的研究。C.Gallardo等人进行了一项体内实验研究。对4头家猪接种了NH/P68ASF病毒,在接种后的72天,再引入两头猪进行接触和病毒暴露,接种的猪出现了亚临床症状,并且可以从相关组织中检测到病毒,后引入的接触猪表现出轻度或无临床症状,但有血清阳性反应,并在接触后28天检测到短暂的病毒血症。

ASFV毒株分为高毒、中等毒和低毒毒株。高毒性毒株通常是导致感染后4-9天内死亡率高达%;中等毒性毒株感染引起急性和亚急性临床症状,死亡率在30-70%的范围内;低毒性毒株感染引起的猪常呈现,慢性发病经过,临床症状和病变不具有特异性,可能持续数月,引起一系列疾病,症状包括皮肤溃疡和关节炎、发育迟缓、消瘦、跛足、肺炎和流产,但死亡率较低,这可能是病毒在发展过程中自然衰减的结果。

试验方法:

使用毒株:NH/P68分离株(NHV)是一种低毒性的非洲猪瘟病毒毒株,从年葡萄牙发生的ASF疫情期间长期感染的猪身上分离得到。四头猪(C1,C2,C3,C4)分别注射TCID50病毒量,接种72天后,将另外两个猪CC13和CC14与感染的四头猪同栏,每天记录的七个临床症状,分别在感染后的0,4,8,11,14,18,21,30,37,44,52,58,65,72,79,86,93,,,,,和收集血清样本。分别在接种后的35天(C1),65天(C4),99天(C3)和天(C2)安乐死感染猪,在暴露后42天(CC14)和62天(CC13)(dpe)安乐死暴露猪。然后用PCR检测非洲猪瘟病毒。用猪外周血巨噬细胞进行病毒分离和滴定。用酶联免疫吸附法检测血清中asfv特异性抗体

结果:

1、感染动物

临床表现:复发性短暂发热,关节肿胀,皮肤的红肿和坏死,体重逐渐减轻,呼吸窘迫伴痉挛性咳嗽超过一个月。在感染35到65天的猪尸检中发现的肉眼病变包括纤维素性病变,在感染99天进行屠宰的猪患有严重肺炎,肺部分有干酪样小叶实变和钙化,胸部淋巴结有局灶性病变。在感染后屠宰的无症状动物(C2)中未发现明显的病变。

在慢性感染严重C1猪中,病毒血症在感染后18天时被检测到,且在感染35天时被宰杀之前一直呈阳性。有趣的是,尽管回收的各猪血清有相似的Ct值,但在猪C3中没有发现传染性病毒,猪C3出现了持续两个多月的病毒血症。在试验期间,无症状动物抗asfv抗体滴度较低,而有症状动物滴度极高()。

在感染后的35和65天屠宰的两只接种动物的所有组织样本中,通过PCR检测到了非洲猪瘟病毒核酸。在PBM细胞中传代三次后

ASFV分别从16例(84.21%)和12例(63.15%)不同组织样本中恢复得到了病毒。在感染99天后的安乐死动物中,在采集的19个组织中有12个(63.1%)检测到病毒基因组,但是病毒只能从肺和纵隔淋巴结中恢复。然而,这些样品产生高滴度值(TCDI50/毫升)。在天屠宰的接种动物(C2)样本中,未发现ASFV阳性结果。

2、接触动物

临床症状;在感染72天时,将两头猪与接种动物同栏成为暴露猪。此时,接种的动物都有高的抗体滴度,其中一个(C3)有弱的病毒血症。在其中一头接触型猪(CC14)中,临床症状与接种组相似,主要表现为关节肿胀,温度超过40°C和呼吸系统疾病。第二接触猪(CC13)除了在暴露后45天时出现40°C以上的微弱发热峰值外,未出现任何可检测的临床症状。尸检发现肉眼可见病变,包括肺的干酪样坏死和局灶性矿化、气管腔内纤维蛋白沉积、水肿和部分充血的支气管淋巴结,这些症状在CC14(暴露后42天屠宰的猪)身上更为严重。

第一个病毒血症高峰出现在暴露后28天时的猪CC14身上,而在感染49和56天时发现了两个病毒血症高峰。在这两只动物身上都发现了抗体。在暴露猪CC14所有检测组织中均发现了非洲猪瘟病毒核酸,病毒含量在10^6.3–10^8.3TCID50/ml.在暴露的猪CC13(暴露62天时)中,19个组织样本中有10个(52.5%)获得了阳性PCR结果,但是在原代培养中经过三次传代后没有发现病毒.

分析:

高致病非洲猪瘟病毒存在的猪场无疑死亡率非常高,养殖户可以采取的措施非常有限。但是通过临床我们发现,非洲猪瘟病毒致死率并不是%,它在某些猪场引起的症状非常严重,死亡率非常高,但是在某些猪场却表现症状轻微。这是因为非洲猪瘟毒株存在致病性差异,对于中、低度致病性毒株感染的猪场,我们可以采取预防和治疗措施将损失降到最低,也可以为复养提供数据支撑。实验中我们可知,慢性感染猪,无症状阳性猪,以及有症状阳性猪但是低感染性猪都是存在的,这就解释了为什么临床看起来毫无症状的猪做PCR检测时却能检查到病毒核酸。那么,在拔牙过程中,这些猪要怎么处理?在巴西和伊比利亚半岛等受影响地区(-年)进行的实地研究表明分别有3.5%和0.6%的新非瘟疫情被认为是由最初感染后康复的家猪血清阳性引起的。这些亚临床症状或者慢性感染症状的出现可能由于以前接触过低剂量的病毒和/或出现了毒性减弱的相关病毒。

实验表明,在感染99天后,病毒在肺和胸淋巴结中的病毒量(TCDI50)足以感染初生猪。病毒在呼吸道等器官的持续存在意味着病毒向其他动物传播的危险因素,从而可能有助于疾病的传播和维持。也有实验表明,在感染后天以上的接种中等毒力病毒的猪仍然具有感染性。病毒血症幸存的猪能够从口咽排出病毒至少70天。

在整个实验研究中,有一个接种动物(C2)始终无症状,尽管它的抗体反应在感染第8天时被检测到,并持续到天,这表明它感染了ASFV。没有临床症状可能与较低的短暂的病毒血症水平有关,这些病毒血症可能出现在采集第一批血液样本之前。在组织样本中没有分离到ASFV(dpi)可能反映了该特定猪的低瞬时病毒血症水平的存在。在无症状动物中检测到的抗非洲猪瘟病毒特异性抗体滴度低于发生慢性感染的猪。

小编有话说:该实验样本量虽然不多,但是可以为后续实验和临床工作提供数据支撑。感染了低毒毒株ASFV的猪能够在感染后3个月内传播病毒,并且感染性病毒可在组织中保留长达99天。因此,即使是在非瘟过去一段时间,临床症状轻微等情况上依旧不能排除是非瘟的可能。以后非瘟病毒在中国大地存在是常态,并且病毒也会不断发生变化,为了存活下去出现低致病性和减毒的情况。由文章中的实验我们可以知道非瘟病毒在肺脏中存留时间很长,它或许可以通过形成气溶胶在空气中传播。我们不能排除这种病毒可能在某些组织中潜伏感染,然后又在某些自然或诱发条件下(运输、喂养不足、免疫抑制等)可能被重新激活,从而促进其传播的可能性。

所以针对非瘟遗留下来的这些没有症状不那么像非洲猪瘟的猪,后续未发病或者后续发病了,实际上它还是因为体内非洲猪瘟病毒引起的。

如果是针对有条件的猪场,做PC确定阳性直接淘汰,但是如果是没有条件做检测的猪场,这些无症状的猪,没有条件去发现,虽然有的症状轻微但是也不能排除是非瘟的可能。

症状轻微的猪场一般是由低毒性感染的毒株引起的,国家规定一经发现绝对扑杀,但是像这种症状轻微的养猪场,在不确定的情况下后续还是可以通过例如中药赛力佳,拜耳的强力拜固舒还有类似黄芪多糖,高免多抗肽这些药物保健,提高免疫力等手段进行挽救,减少最低损失。不管的新冠还是非瘟严防死守+提高免疫力才是王道。

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